Schnelles und einfaches Verfahren zur Herstellung einzelner Nukleoside aus DNA für die quantitative Analyse mittels LC/MS
Bequemer 2-stündiger Verdau mit einem einzigen Enzym im Vergleich zum herkömmlichen 6-16-stündigen mehrstufigen Enzymverdau
protokoll
BESCHREIBUNG
DNA Degradase Plus von Zymo Research ist eine Nuklease-Mischung, die DNA schnell und effizient in ihre einzelnen Nukleosidkomponenten zerlegt. Da Nukleoside kein negativ geladenes Phosphat enthalten, ist DNA Degradase Plus ideal für die DNA-Methylierungsanalyse des gesamten Genoms mittels LC/MS. Die Verdauung mit dem Enzym erfolgt in einem einstufigen Verfahren, das schneller und einfacher ist als andere verfügbare Methoden.
TECHNISCHE DATEN
Assay-BedingungenDNA Degradase Plus in 1X DNA Degradase-Reaktionspuffer. Inkubation der Reaktionsmischungen bei 37C für ≥1 Stunde
Konzentration5 U/µl
Enzym-InaktivierungEnzym bei 70°C 20 Minuten lang inaktivieren
Definition der Einheit5 U des Enzyms verdauen 1 µg genomische DNA in 25 µl Reaktionsvolumen bei 37C für ≥ 1 Stunde
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