Präzise miRNA-Profilierung: Eine einzigartige Einzeladapter- und Zirkularisierungsstrategie reduziert Ligationsverzerrungen und erhöht die miRNA-Erkennung.
Direkter Nachweis: Erzeugt kleine RNA-Bibliotheken, ohne dass eine Anreicherung kleiner RNAs erforderlich ist.
Gel-frei: Entfernt Adapterdimere aus jedem Input ohne langwierige Gelexzision.
BESCHREIBUNG
Das Zymo-Seq™ miRNA Library Kit ist ein innovatives Bibliotheksvorbereitungskit für die Sequenzierung von kleinen RNAs, das eine Einzeladapter- und Zirkularisierungsstrategie verwendet, um Ligationsverzerrungen zu reduzieren und eine genaue Profilierung von kleinen RNAs aus zellfreier RNA (cfRNA) und Gesamt-RNA zu ermöglichen. Dieser einfache, gestraffte Arbeitsablauf minimiert den Zeitaufwand und nutzt die gel-freie Entfernung von Adapterdimeren, um gestrandete kleine RNA-Bibliotheken aus Plasma, Bioflüssigkeiten, Zellen, Geweben und mehr zu generieren.
Zur Herstellung von Zymo-Seq™ miRNA-Bibliotheken wird die RNA an den einzelnen miRNA-Adapter ligiert und das ligierte Produkt zirkularisiert. Überschüssiger Adapter wird blockiert und mit speziellen magnetischen Beads entfernt, die einen vollständig gelfreien Arbeitsablauf für Input von nur 1 ng ermöglichen. Das zirkularisierte miRNA-Adapterprodukt wird dann revers transkribiert. Die resultierende cDNA wird mit Indexing-PCR-Primern amplifiziert, die Illumina-kompatible Adapter und einzigartige Dual-Index-Sequenzen (UDI) für kostengünstiges Multiplexing hinzufügen. Das Kit enthält alles, was für die Herstellung sequenzierfähiger Bibliotheken benötigt wird, einschließlich Indexierungsprimer und SPRI-Beads. Das ist RNA-Seq leicht gemacht.
Spezifikationen
Zusätzlich benötigte Komponenten (nicht im Lieferumfang enthalten) - Reines Ethanol in Molekularbiologiequalität (> 95 %)
Maximaler Input - 200 ng Gesamt-RNA oder RNA extrahiert aus 200 µL Plasma oder Serum.
Minimaler Input - 1 ng Gesamt-RNA oder RNA extrahiert aus 50 µl Plasma oder Serum.
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