Das T7 High Yield RNA Synthesis Kit optimiert das Transkriptionsreaktionssystem. Das Kit kann die einzelsträngige RNA effizient synthetisieren, indem es die T7-RNA-Polymerase, die lineare doppelsträngige DNA mit der T7-Promotorsequenz als Vorlage und NTPs als Substrat zur Kontrolle der DNA-Sequenz stromabwärts des Promotors verwendet. Während der Transkription können dem Substrat modifizierte Nukleotide hinzugefügt werden, um Biotin- oder Farbstoff-markierte RNA herzustellen.
Mit diesem Kit können lange und kurze Transkripte synthetisiert werden. Mit 1 μg DNA-Template können 100-200 μg RNA produziert werden. Die durch Transkription synthetisierte RNA kann für verschiedene nachgeschaltete Anwendungen verwendet werden, z. B. RNA-Struktur- und Funktionsforschung, RNase-Schutz, Sondenhybridisierung, RNAi, Mikroinjektion und In-vitro-Translation.
Merkmal
Bis zu 180 μg RNA pro Reaktion aus 1 μg der Kontrollvorlage
Optimiertes Reaktionssystem für den IVT-Prozess
Verringerung der dsRNA-Produktion
Höhere RNA-Integrität und -Reinheit
FAQs:
1. Geringe Transkriptausbeute
Die Qualität der Vorlage ist eng mit der Ausbeute verbunden. Ist die Ausbeute der Versuchsgruppe deutlich geringer als die der Kontrollgruppe, kann dies folgende Gründe haben:
① die Versuchsvorlage enthält hemmende Komponenten;
② Die Vorlage hat einen Fehler.
Vorschläge:
① Reinigen Sie die Vorlage erneut;
② Bestimmen Sie die Quantifizierung der Vorlage und ihre Integrität;
③ Verlängern Sie die Reaktionszeit;
④ Erhöhen Sie die Menge des eingegebenen Templates;
⑤ Andere Promotoren und RNA-Polymerasen ausprobieren.
---