Dieses Produkt ist eine Bakteriophagen-T7-RNA-Polymerase, die durch rekombinante Proteinexpression in Escherichia coli gewonnen wird. Sie katalysiert die 5'→3'-Synthese von RNA auf doppelsträngiger DNA aus ihrer T7-Promotorsequenz (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') und verwendet NTPs als Substrate. Die DNA mit doppelsträngigen linearen stumpfen Enden oder 5'-überstehenden Enden kann als Vorlage für die T7-RNA-Polymerase verwendet werden, so dass linearisierte Plasmide und PCR-Produkte als Vorlagen für die In-vitro-Synthese von RNA verwendet werden können.
Anmerkung: G* ist die erste Base des RNA-Transkripts.
Dieses Produkt wird in Übereinstimmung mit den GMP-Vorschriften hergestellt und in flüssiger Form geliefert.
Merkmal
Synthese von langen und kurzen Transkripten; mit 1 μg DNA-Template können 100-200 μg RNA hergestellt werden
Höhere Ausbeute und einfach zu bedienen
Geringere Endotoxine
Getestet auf die Abwesenheit von Endonukleasen, Exonukleasen und RNasen
Anwendung
Herstellung radiomarkierter RNA-Sonden
RNA-Generierung für Studien zur RNA-Struktur, -Prozessierung und -Katalyse
Expressionskontrolle durch Anti-Sense-RNA
Spezifikation
Quelle - Rekombinanter E. coli mit T7-RNA-Polymerase-Gen
Optimale Temperatur - 37℃
Lagerpuffer - 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0,1% Triton X-100,50% (v/v) Glycerin,pH7.9 bei 25℃
Definition der Einheiten - Die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 1 nmol [3H] GMP innerhalb von 1 Stunde bei 37°C und pH 8,0 in das säureunlösliche Präzipitat einzubauen, wird als 1 Einheit definiert.
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