Enzyme-Reagenz GspSSD

DNA-Polymerasefür isotherme AmplifikationLAMP-Kit

OptiGenes Original-Mastermix für die isotherme Amplifikation - einfach Template und Primer hinzufügen. Enthält OptiGenes neuartige, proprietäre GspSSD LF DNA Polymerase. Überlegene Amplifikationsgeschwindigkeit. Geeignet für die schnelle isotherme Amplifikation von DNA. Native Reverse-Transkriptase-Aktivität ermöglicht Single-Enzyme-RT-LAMP. Ein DNA-Ziel (VKORC1) wurde aus humaner gDNA (Sigma) amplifiziert. 25 μl LAMP-Reaktionen wurden bei 65 ºC für 60 Minuten auf einem Echtzeit-Thermocycler (Roche LC-480) in doppelter Ausführung durchgeführt. Die "Zeit bis zum Ergebnis" ist definiert als die Zeit, in der der Fluoreszenzwert der Amplifikation einen Schwellenwert von 10 % der maximalen Fluoreszenz erreicht. Die Isothermal Master Mixes von OptiGene (ISO-001 und ISO-004) wurden mit dem WarmStart LAMP Kit (DNA & RNA) von NEB [Lot:0021609] verglichen. ISO-001 und ISO-004 enthalten KEIN spezifisches Reverse-Transkriptase (RT)-Enzym. Für einen echten Vergleich mit dem NEB-Mix (der ein separates und spezifisches Reverse-Transkriptase-Enzym enthält) wurden 0,5U AMV-RT zu den OptiGene Master Mix-Reaktionen (ISO-001 inkl. RT und ISO-004 inkl. RT) hinzugefügt. Standard-ISO-001- und ISO-004-RT-LAMP-Reaktionen wurden ebenfalls verglichen, um die ausgezeichnete inhärente Reverse-Transkriptase-Aktivität des Mixes zu zeigen. Ein RNA-Target (Beta-Actin) wurde aus humaner Gesamt-RNA (Ambion) amplifiziert. 25μl RT-LAMP-Reaktionen wurden bei 65 ºC für 60 Minuten auf einem Echtzeit-Thermocycler (Roche LC-480) in doppelter Ausführung durchgeführt. Die "Zeit bis zum Ergebnis" ist definiert als die Zeit, in der der Fluoreszenzwert der Amplifikation einen Schwellenwert von 10 % der maximalen Fluoreszenz erreicht.