Enzyme-Reagenzkit ClonExpress II

für PCR

Vazyme ClonExpress II One Step Cloning ist eine einfache, schnelle und hocheffiziente Klonierungstechnologie und ermöglicht die gerichtete Insertion jedes amplifizierten DNA-Produkts in jeden linearisierten Vektor an jeder beliebigen Stelle. Zunächst wird der Vektor an der Klonierungsstelle linearisiert. Eine kleine Sequenz, die sich mit jedem Ende der Klonierungsstelle überlappt, wird durch PCR an das Insert angefügt. Das Insert und der linearisierte Vektor mit überlappenden Sequenzen von 15 bp - 20 bp am 5'- bzw. 3'-Ende werden in einem geeigneten Verhältnis gemischt und mit der Rekombinase Exnase II bei 37℃ für 30 Minuten inkubiert. ClonExpress II ist ein neuartiges, von der DNA-Ligase unabhängiges Klonierungs-Kit, das die Zahl der selbstligierten Kolonien deutlich reduziert und eine Echt-Positiv-Rate von > 95 % ermöglicht. Die verbesserte Exnase II und der optimierte Puffer verbessern die Rekombinationseffizienz und die Toleranz gegenüber Verunreinigungen erheblich. Sowohl der linearisierte Vektor als auch die PCR-Produkte des Inserts können ohne Aufreinigung direkt für die Rekombination verwendet werden, was die Verfahren erheblich vereinfacht. Produkt-Merkmale Einfach, schnell, effizient, für jeden Träger geeignet; Die vom Insert getragene Restriktionsstelle muss nicht berücksichtigt werden; Effiziente Klonierung von 50 bp-10 kb DNA-Fragmenten; Linearisierter Klonierungsvektor und PCR-Produkte können direkt ohne Aufreinigung kloniert werden; Keine Ligase, keine Selbstkonnektion, positive Rate >95%.