Recombinant RNase Inhibitor ver.2.0 ist ein oxidationsresistenter RNase-Inhibitor, der in enzymatischen Reaktionen, die niedrige DTT-Konzentrationen erfordern, wie z. B. in vitro-Transkription, in vitro-Translation oder RT-PCR, sehr stabil ist. Der aus Schweineleber gewonnene Recombinant RNase Inhibitor ver.2.0 weist aufgrund einer Mutation in einem sehr oxidationsempfindlichen Cysteinrest eine stark erhöhte Oxidationsbeständigkeit auf, die den Abbau und die Inaktivierung des Enzyms unter oxidierenden Reaktionsbedingungen verhindert.
Das Enzym bildet einen 1:1-Komplex speziell mit RNase A, um die RNase-Aktivität zu hemmen; es ist jedoch nicht wirksam gegen die RNase-H-Aktivität. Die Hemmungsreaktion ist reversibel, und der Inhibitor kann irreversibel inaktiviert werden, um die Ribonukleaseaktivität wiederherzustellen, indem der Komplex mit Harnstoff oder einem Sulfhydrylreagenz dissoziiert wird. Im Gegensatz zu anderen kompetitiven Inhibitoren, die keine Proteine sind (z. B. Nukleotide und anorganische Phosphate), kann der Inhibitor außerdem leicht durch Phenol-Extraktion aus dem Reaktionssystem entfernt werden.
Recombinant RNase Inhibitor ver.2.0 enthält eine Mutation in einem Cysteinrest, der sehr oxidationsempfindlich ist, was ihn in enzymatischen Reaktionen, die niedrige DTT-Konzentrationen erfordern, sehr stabil macht. Er hemmt die Aktivität von RNase A durch die Bildung eines 1:1-Komplexes in einer reversiblen Reaktion. Es ist nicht wirksam gegen die RNase H-Aktivität.
Überblick
Effizienter RNAse-A-Inhibitor
Äußerst stabil gegen Oxidation
Ideal für Anwendungen, die eine niedrige DTT-Konzentration erfordern, wie z. B. in vitro Transkription, in vitro Translation oder RT-PCR
Geeignet für die Langzeitlagerung von Proben
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