Die Glykosylierung ist ein enzymatischer Prozess, bei dem Kohlenhydratgruppen an das Rückgrat von Proteinen oder Lipiden angehängt werden. Die Glykosylierung von Proteinen ist eine der häufigsten posttranslationalen Modifikationen und kommt in allen lebenden Organismen vor. Sie beeinflusst Prozesse wie die Proteinfaltung, die Stabilität und die Membranorganisation. ProMoSCOPE™ Single Cell Glycosylation Detection Kits ermöglichen die genaue Quantifizierung des Glykosylierungsgrads an der Zelloberfläche zusammen mit Genexpressionsprofilen auf Einzelzellebene. Dies wird durch eine chemoenzymatische Methode erreicht, bei der der ProMoSCOPE-Tag kovalent an N-Acetyllactosamin (LacNAc) an der Zelloberfläche bindet. Der Glykosylierungsgrad kann zusammen mit der gesamten Transkriptom-Information für eine eingehende Analyse des Zellstatus und der Funktionen in komplexen biologischen Systemen genutzt werden.
Das ProMoSCOPE™ Single Cell Glycosylation Detection Kit verwendet den SCOPE-Chip®, einen tragbaren, mikrofluidischen Chip mit Mikrovertiefungen, der mehrere Schritte des Arbeitsablaufs integriert, wie z. B. die Erfassung von Einzelzellen, die Zelllyse und die Erfassung zellulärer mRNA. Mit den mitgelieferten Reagenzien können sequenzierfertige Bibliotheken hergestellt werden. Der SCOPE-chip® ist einfach zu bedienen und kann ohne spezielle Ausrüstung manuell betrieben werden. Er ist für Zellen aus einer Vielzahl von Gewebetypen geeignet.
Der Thymus von Mäusen wird extrahiert und sowohl markierte als auch unmarkierte Einzelzellsuspensionen werden auf den SCOPE-chip® geladen und mit dem ProMoSCOPE™ Single Cell Glycosylation Detection Kit verarbeitet. Die Zellen werden im UMAP-Plot annotiert und in (A) dargestellt. UMAP-Plot nach Behandlung gefärbt ist in (B) dargestellt.
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