Dieser HTRF-Kit dient dem Nachweis von SARS-CoV-2-Spike-S1-Proteinen in Zelllysaten oder Zellüberständen als Marker für eine virale Infektion.
Übersicht
Das SARS-CoV-2 Spike S1-Protein ist einer der beiden Teile des Virus-Spike-Proteins (S). Die S1-Untereinheit ist für die Interaktion des Virus mit den transmembranen Angiotensin-Converting-Enzyme-2-Rezeptoren (ACE2) der Wirtszellen verantwortlich, während die S2-Untereinheit zu Konformationsänderungen fähig ist, die die Fusion der viralen Partikelhülle mit der Wirtszellmembran nach der S1/ACE2-Bindung ermöglichen. Das S1-Protein wird daher eingehend auf seine Rolle bei der Virusinfektion untersucht und ist ein zuverlässiger Marker für die Infektion sowie ein potenzielles Ziel für ein Impfstoff-Immunogen.
Andere Spezifikationen
Größe der Einheit 500 Assay-Punkte
Wie es funktioniert
SARS-CoV-2-Partikel werden in Zelllysaten mittels eines Sandwich-Immunoassays mit einem monoklonalen Anti-S1-Antikörper nachgewiesen, der mit Terbium-Cryptat oder d2 markiert ist, wodurch die Qualität des Assays, die Reproduzierbarkeit und die Signalqualität gewährleistet werden. Das erzeugte spezifische HTRF-Signal ist proportional zur Menge der S1-Proteine.
Das Assay-Protokoll, das eine 384-Well-Platte mit kleinem Volumen oder eine 96-Well-Platte mit geringem Volumen (20 µL final) verwendet, ist auf der rechten Seite beschrieben. 16 µL der Zelllysate oder der Kontrolle werden direkt in die Detektionsplatte gegeben und mit HTRF-Reagenzien nachgewiesen. Die mit HTRF-Donor und -Akzeptor markierten Antikörper können vorgemischt und in einem einzigen Dispensierschritt zugegeben werden, um das Assay-Verfahren weiter zu rationalisieren (4 µL), oder separat (2 µL).
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