Testkit für Forschungszwecke HTRF

für Zellen

Der Gesamt-H2AX-Kit dient zur Überwachung der Expression von zellulärem humanem H2AX und kann als Normalisierungstest für den Phospho-H2AX (Ser139)-Detektionskit verwendet werden. Übersicht Der Total-H2AX-Kit ermöglicht den quantitativen Nachweis der humanen Histonvariante H2AX. Die spezifische Phosphorylierung von H2AX an Ser139 kann auftreten, wenn doppelsträngige DNA bricht, entweder durch ionisierende Strahlung oder durch endogene physiologische Prozesse. Diese als gamma-H2AX (phospho-Ser139) bezeichnete Modifikation löst einen Stillstand des Zellzyklus und die Reparatur von DNA-Schäden aus, wodurch sich dieser Assay besonders für die Untersuchung der Genomstabilität, des Zellzyklus und der DNA-Reparatur eignet und im weiteren Sinne als Biomarker für Krebs und für Untersuchungen des Alterungsprozesses eingesetzt werden kann. Andere Spezifikationen Größe der Einheit 500 Assay-Punkte Wie es funktioniert Prinzip des Gesamt-H2AX-Assays Der Total-H2AX-Assay quantifiziert das Expressionsniveau von H2AX in einem Zell-Lysat. Im Gegensatz zum Western Blot ist der Assay vollständig plattenbasiert und erfordert keine Gele, Elektrophorese oder Transfer. Der Total-H2AX-Assay verwendet zwei markierte Antikörper: einen, der an einen Donor-Fluorophor gekoppelt ist, und einen, der an einen Akzeptor gekoppelt ist. Beide Antikörper sind hochspezifisch für ein bestimmtes Epitop auf dem Protein. Bei Anwesenheit von H2AX in einem Zellextrakt bringt die Zugabe dieser Konjugate das Donor-Fluorophor in unmittelbare Nähe zum Akzeptor und erzeugt dadurch ein FRET-Signal. Dessen Intensität ist direkt proportional zur Konzentration des in der Probe vorhandenen Proteins und ermöglicht die Bewertung der Proteinexpression in einem No-Wash-Assay-Format.