Dieser HTRF-Kit ermöglicht den zellbasierten quantitativen Nachweis von phosphoryliertem STING der Maus als Indikator für die Aktivierung des cGAS-STING-Signalwegs.
Übersicht
Dieser zellbasierte HTRF-Assay ermöglicht die bequeme und genaue Quantifizierung von phosphoryliertem STING der Maus an Ser365. Nach einer Pathogeninfektion und der Bindung von dsDNA an den zytoplasmatischen Sensor cGAS wird das STING-Protein durch TBK1 phosphoryliert. Dadurch wird seine Bindung an IRF3 ermöglicht, was die Produktion von IFNs Typ 1 und andere Immunreaktionen auslöst. Der STING-Signalweg wird dann durch den STING-Abbau über die Autophagie ausgeschaltet.
Andere Spezifikationen
Größe der Einheit 500 Assay-Punkte
Wie es funktioniert
Maus Phospho-STING (Ser365) Assay-Prinzip
Der Mouse Phospho-STING (Ser365) Assay misst die Phosphorylierung von Mouse STING an Ser365. Im Gegensatz zum Western Blot ist der Assay vollständig plattenbasiert und erfordert keine Gele, Elektrophorese oder Transfer. Beim Mouse Phospho-STING (Ser365) Assay werden zwei markierte Antikörper verwendet: einer mit einem Donor-Fluorophor, der andere mit einem Akzeptor. Der erste Antikörper wird aufgrund seiner spezifischen Bindung an das phosphorylierte Motiv auf dem Protein ausgewählt, der zweite aufgrund seiner Fähigkeit, das Protein unabhängig von seinem Phosphorylierungszustand zu erkennen. Die Phosphorylierung des Proteins ermöglicht die Bildung eines Immunkomplexes, an dem die beiden markierten Antikörper beteiligt sind. Dies bringt das Donor-Fluorophor in unmittelbare Nähe zum Akzeptor, wodurch ein FRET-Signal entsteht. Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des phosphorylierten Proteins in der Probe und ermöglicht die Bewertung des Phosphorylierungszustands des Proteins in einem No-Wash-Assay-Format.
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