AAV8 Titration ELISA Test Kit ist ein kompetitiver Enzymimmunoassay für die quantitative Bestimmung von AAV Serotyp 8 Partikeln in Zellkulturüberständen und gereinigten Viruspräparaten.
Produkt-Beschreibung
Das REAGEN AAV8 Titration ELISA Test Kit ist ein kompetitiver Enzymimmunoassay für die quantitative Bestimmung von AAV Serotyp 8 Partikeln in Zellkulturüberständen und gereinigten Viruspräparaten.
Adeno-assoziierte Viren (AAV) sind nicht-pathogene ssDNA-Viren, die als virale Vektoren für die Gentherapie intensiv untersucht werden. Das Virus transduziert eine Vielzahl von sich teilenden und sich nicht teilenden Zellen und zeigt eine langfristige Genexpression mit geringer zellulärer Immunreaktion. AAV wurde in mehreren klinischen Studien eingesetzt (z. B. FIX, CFTR, Parkinson, Canavan-Krankheit), wobei keine schwerwiegenden vektorbedingten unerwünschten Wirkungen festgestellt wurden. Zu den Methoden für die Charakterisierung von AAV-Präparaten gehören derzeit Titrations-ELISA, qPCR, ddPCR, DNA-Dot-Blot, Bestimmung der transduzierenden Einheiten, Infektionszentrum-Assay, SDS-PAGE oder Elektronenmikroskopie. Die Immunotitration mittels REAGEN' AAV8 Titration ELISA bietet eine schnelle, empfindliche und reproduzierbare Methode für die Titration intakter AAV8-Wildtyp-Virionen, rekombinanter AAV8-Virionen oder assemblierter und intakter leerer AAV8-Kapside.
Überblick über das Verfahren
REAGEN Der Assay basiert auf der Sandwich-ELISA-Technik. Ein monoklonaler Antikörper, der für ein Konformationsepitop auf assemblierten AAV8-Kapsiden spezifisch ist, wird auf Streifen einer Mikrotiterplatte aufgetragen, und die eingefangenen AAV-Partikel werden in zwei Schritten nachgewiesen:
Ein weiterer Anti-AAV8-Antikörper wurde als Nachweisantikörper verwendet.
Ein sekundärer Anti-Human-IgG-Fc-Antikörper reagiert mit dem Immunkomplex.
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