Gemessen an seiner Fähigkeit, die 5'-Phosphatgruppe vom Substrat Adenosin-5'-monophosphat (AMP) zu hydrolysieren. Das Orthophosphatprodukt wird mit einem Malachitgrün-Phosphat-Detektionskit gemessen. Die spezifische Aktivität beträgt >12.500 pmol/min/μg, gemessen unter den beschriebenen Bedingungen.
N-terminale Sequenz
Analyse - Trp27
Vorhergesagte Molekülmasse - 85 kDa
SDS-PAGE - 84-93 kDa unter reduzierenden Bedingungen.
Trägerfrei
Was bedeutet CF?
CF steht für Carrier Free (CF). Wir fügen unseren rekombinanten Proteinen in der Regel Rinderserumalbumin (BSA) als Trägerprotein hinzu. Durch den Zusatz eines Trägerproteins wird die Stabilität des Proteins erhöht, die Haltbarkeit verlängert und das rekombinante Protein kann in einer verdünnten Konzentration gelagert werden. Die trägerfreie Version enthält kein BSA.
Welche Formulierung ist die richtige für mich?
Im Allgemeinen raten wir zum Kauf des rekombinanten Proteins mit BSA für die Verwendung in Zell- oder Gewebekulturen oder als ELISA-Standard. Im Gegensatz dazu wird das trägerfreie Protein für Anwendungen empfohlen, bei denen die Anwesenheit von BSA stören könnte.
Assay-Verfahren
Materialien
Assay-Puffer: 25 mM Tris, 5 mM MgCl2, pH 7,5
Rekombinante humane 5'-Nukleotidase/CD73 Fc-Chimäre (rhCD73/mFc)
Substrat: Adenosinmonophosphat (AMP), 5 mM Stamm in deionisiertem Wasser
Malachitgrün-Phosphat-Detektionskit
klare 96-Well-Platte
Plattenlesegerät mit Absorptionsmessfunktion
Bereiten Sie eine Standardkurve aus dem 1-M-Phosphat-Standard vor, indem Sie 10 µL des 1-M-Phosphat-Standards zu 990 µL Assay-Puffer hinzufügen, um einen 10-mM-Stamm zu erhalten. Fahren Sie fort, indem Sie 10 µL der 10-mM-Phosphatlösung zu 990 µL Assay-Puffer hinzufügen, um eine 100-µM-Lösung zu erhalten (dies ist die erste Verdünnung, die als Standard verwendet wird).
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