Hochempfindlicher Caspase-Assay - benötigt weniger Zellen und weniger Enzyme
Einfaches Add-Mix-Measure-Protokoll - keine Probenvorbereitung
Leicht skalierbar auf 96-, 384- und 1.536-Well-Plattenformate
Homogener Assay misst Caspase-3/7-Aktivität
Der Caspase-Glo® 3/7 Assay enthält ein prolumineszentes Caspase-3/7 DEVD-Aminoluciferin-Substrat und eine proprietäre thermostabile Luciferase in einem Reagenz, das für Caspase-3/7-Aktivität, Luciferase-Aktivität und Zelllyse optimiert ist. Die Zugabe des einzelnen Caspase-Glo® 3/7 Reagenz in einem "add-mix-measure"-Format führt zur Zelllyse, gefolgt von der Spaltung des Substrats durch die Caspase. Dadurch wird freies Aminoluciferin freigesetzt, das von der Luciferase verbraucht wird und ein "glühendes" Leuchtsignal erzeugt, das proportional zur Caspase-3/7-Aktivität ist.
Die stabilisierte Luciferase und das firmeneigene Puffersystem verbessern die Assay-Leistung über einen weiten Bereich von Assay-Bedingungen, und der Assay wird weniger wahrscheinlich durch Interferenzen von Substanzen beeinträchtigt als fluoreszierende oder kolorimetrische Assays. Der Caspase-Aktivitätsassay ist für die Verwendung mit Multiwell-Plattenformaten konzipiert, die entweder gereinigtes Enzym oder Zellen in Kultur verwenden, und kann mit anderen zellbasierten Assays multiplexiert werden. Die hohe Empfindlichkeit ermöglicht den Einsatz des Caspase-Glo® 3/7-Assays in 3D-Zellkultursystemen. Der Assay liefert hervorragende Z'-Faktor-Werte in Zell- und gereinigten Enzymmodellen.
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