Linear über acht oder mehr Größenordnungen der Enzymkonzentration.
Empfindlich für 10-20 Mol Luziferase.
Einfacher nicht-homogener Assay zur Quantifizierung der Firefly-Luciferase-Aktivität
Das Luciferase Assay System ist ein extrem empfindliches und schnelles Reagenz für die Quantifizierung von Glühwürmchen-Luciferase. Lineare Ergebnisse werden über mindestens acht Größenordnungen der Enzymkonzentration erzielt, und unter optimalen Bedingungen können weniger als 10-20 Mol Luziferase gemessen werden. Im Allgemeinen kann eine 100-fach höhere Empfindlichkeit als mit dem Chloramphenicol-Acetyltransferase (CAT)-Test erreicht werden.
Das Luciferase-Assay-Reagenz erzeugt Licht, das mindestens eine Minute lang nahezu konstant ist, so dass der Assay mit der Messung von Luciferase unter Verwendung eines Luminometers mit einem einzigen Röhrchen oder eines Luminometers mit mehreren Vertiefungen und einem Autoinjektor kompatibel ist. Ein Luminometer ist vorzuziehen, aber nicht erforderlich, da der Assay an Szintillationszähler angepasst werden kann.
Zelllysereagenzien, die mit dem Luciferase-Assay-System verwendet werden
Das Luziferase-Assay-System ist ein inhomogener Assay; die Zellen, die die Luziferase enthalten, müssen vor der Zugabe der Reagenzien lysiert werden. Glo Lysis Buffer , Cell Culture Lysis Reagent , Passive Lysis Buffer und Reporter Lysis Buffer können mit dem Luciferase Assay System für die Reporterquantifizierung in Säugetierzellen verwendet werden. Der Reporter-Lysepuffer ermöglicht die Durchführung von Luciferase-, CAT- und β-Galactosidase-Assays mit demselben Zellextrakt. Das Luciferase Assay System kann auch für die Quantifizierung in Pflanzen- und Bakterienzellen verwendet werden, aber nur das Cell Culture Lysis Reagent ist für diese Anwendungen geeignet.
In einigen Kits ist der Lysepuffer enthalten, in anderen muss er separat erworben werden
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