Das RNA-Solv® Reagenz ist ein Ein-Reagenz-System für die Isolierung von Gesamt-RNA aus Zellen und Geweben. Das Reagenz, eine einphasige Lösung aus Phenol und Guanidinisothiocyanat, ist eine Abwandlung der von Chomczynski und Sacchi (1) entwickelten einstufigen RNA-Isolierungsmethode. Die Probe wird homogenisiert und in RNA-Solv® Reagenz lysiert, das die Integrität der RNA bewahrt und gleichzeitig endogene RNasen und andere zelluläre Komponenten aufbricht und denaturiert. Durch Extraktion des Lysats mit Chloroform werden die Proteine weiter denaturiert und das Gemisch in eine organische und eine wässrige Phase aufgetrennt. Die RNA verbleibt ausschließlich in der wässrigen Phase und wird anschließend mit Isopropanol zurückgewonnen.
Diese Methode eignet sich für ein breites Spektrum an Ausgangsmaterial: bis zu 1 g Gewebe oder 1 x 108 Zellen menschlichen, tierischen, pflanzlichen oder bakteriellen Ursprungs. Die Einfachheit der RNA-Solv® Reagent-Methode ermöglicht die gleichzeitige Bearbeitung einer großen Anzahl von Proben. Das gesamte Verfahren kann in einer Stunde abgeschlossen werden. Die aufbereitete Gesamt-RNA kann für Northern-Blot-Analysen, Dot-Blot-Hybridisierung, Poly(A)+-Selektion, In-vitro-Translation, RNase-Protection-Assay und molekulares Klonen verwendet werden. Für die Verwendung bei der Amplifikation durch Thermocycling wird eine Behandlung der isolierten RNA mit RNase-freier DNase I empfohlen, wenn die beiden Amplimere innerhalb eines einzigen Exons liegen.
Spezifikationen
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren.
MERKMALE UND SPEZIFIKATIONEN
Volumen 100 mL, 200 mL
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