Reagenzkit / als Lösung E.Z.N.A.®

für PCRNGSNukleinsäure

Isolierung von bis zu 200 µg transfektionsfähiger, endotoxinarmer Plasmid-DNA (<1EU/µg) aus 15-50 mL Bakterienkulturen unter Verwendung von Spritzenfiltern für die Lysatreinigung und Midi-Spin-Säulen Übersicht Das E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Midi Kit bietet eine effiziente Methode für die Isolierung von Plasmid-DNA mit niedrigem Endotoxingehalt in großem Maßstab. Das System verwendet Lysat-Clearance-Filterspritzen anstelle einer Zentrifugation, um bakterielle Lysate nach der alkalischen Lyse schnell zu reinigen. Nach der Lysatreinigung werden die Endotoxine entfernt, und das Protokoll folgt einem einfachen "Bind-Wash-Elute"-Verfahren, um hochwertige Plasmid-DNA zu liefern. Die Ausbeuten variieren je nach Plasmid-Kopienzahl, E. coli-Stamm und Wachstumsbedingungen. 15-50 mL Bakterienkulturen in LB-Medium liefern in der Regel bis zu 200 µg Plasmid-DNA mit hoher Kopienzahl. Bei der Arbeit mit Plasmiden mit geringer Kopienzahl können bis zu 100 ml Kultur verarbeitet werden. Das System verwendet Zentrifugations- oder Vakuumtechnologie für die Plasmidreinigung und macht die zeitaufwändigen Schwerkraft-Säulen überflüssig, die eine Alkoholpräzipitation erfordern. Die gereinigte Plasmid-DNA eignet sich für empfindliche Downstream-Anwendungen wie Transfektion von Säugetierzellen, Klonierung, automatisierte fluoreszierende DNA-Sequenzierung (typische Reads über 800 bp), Sequenzierung der nächsten Generation, Restriktionsenzymverdau, Ligation, PCR, In-vitro-Transkription, Transformation usw. Schnell - Aufreinigung von Plasmid-DNA in < 45 min Sicher - Keine Phenol/Chloroform-Extraktionen Vielseitig - Spin- und Vakuumformate verfügbar Hochwertig - Plasmid-DNA in Transfektionsqualität und mit niedrigem Endotoxingehalt (< 1 EU/µg) Spezifikationen Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.