Das NZYTech SARS-CoV-2 One-Step RT-qPCR Kit III, 5 Targets, IVD, bietet ein komplettes Set an Reagenzien und Sonden für den qualitativen Nachweis des SARS-CoV-2-Genoms mittels gängiger Echtzeit-PCR-Plattformen. Die Virus-RNA-abhängige RNA-Polymerase (RdRp) und die Nukleokapsid-Phosphoprotein (N)-Gene wurden zuvor als hochspezifische Marker für SARS-CoV-2 identifiziert. Darüber hinaus weist dieses Kit eine dritte Region im strukturellen Hüllgen E nach, das allen Sarbecoviren gemeinsam ist und auch in SARS-CoV-2 vorhanden ist. Dieser NZYTech-Kit zielt auf spezifische Regionen im RdRp-, N- und E-Gen des SARS-CoV-2-Genoms ab und bietet so die höchste Nachweisempfindlichkeit.
Die einstufige RT-qPCR ist nach wie vor die zuverlässigste und empfindlichste Methode für den genauen Nachweis von SARS-CoV-2-RNA, die auf eine Infektion des Menschen hinweist. Die aus infizierten Proben isolierte und gereinigte virale RNA wird in cDNA retranskribiert und anschließend in einer einzigen Reaktion mit zwei hochspezifischen Primer/Sonden-Sets nach dem so genannten TaqMan®-Prinzip amplifiziert. Dabei binden die Sonden spezifisch an fünf Regionen des SARS-CoV-2-Genoms. Ein zusätzliches Primer-/Sonden-Set dient als endogene interne Kontrolle zum Nachweis von Nukleinsäuren des humanen RP-Gens und zur Bewertung der Probenqualität. Um die Amplifikation der sechs spezifischen Targets in einer einzigen Reaktion identifizieren zu können, sind die SARS-CoV-2 RdRp-, N- & E-Gene und die humanen RP-spezifischen Sonden unterschiedlich markiert, und zwar mit HEX™-, FAM™-, Texas Red ®- bzw. Cy5™-Reporter-Farbstoffen. Beachten Sie, dass dieses Panel einen Hexaplex-Assay in vier verschiedenen optischen Kanälen enthält, der es ermöglicht, neu auftretende SARS-CoV-2-Mutationen und -Varianten zu kompensieren und so die Zuverlässigkeit Ihrer Ergebnisse zu gewährleisten.
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