DNA-Polymerase-Reagenzkit NZYSupreme

zur Mutationsdetektionenzymatisch

Das NZYSupreme Mutagenese-Kit wurde entwickelt, um Punktmutationen durchzuführen und einzelne oder mehrere Nukleotide in einer DNA-Sequenz zu löschen oder einzufügen. Das System erfordert die Bereitstellung von zwei synthetischen Oligonukleotid-Primern, die die gewünschte Mutation enthalten. Einzelheiten Das NZYSupreme Mutagenese-Kit bietet eine einfache und hocheffiziente Methode zur Erzeugung von Punktmutationen oder zum Löschen/Einfügen einzelner oder mehrerer Nukleotide in jede Art von Plasmid-DNA mittels PCR. Dieses Mutagenese-Kit wurde kürzlich entwickelt, um die Arbeitszeit zu verkürzen und die Effizienz der DNA-Editierung zu erhöhen. Das System erfordert die Bereitstellung von zwei synthetischen, teilweise komplementären Oligonukleotid-Primern, die die gewünschte Mutation enthalten. Die Inkorporation dieser mutierten Oligonukleotid-Primer mit der Supreme NZYProof-DNA-Polymerase, einer hochpräzisen Polymerase, erzeugt ein mutiertes Plasmid mit gestaffelten Nicks, das dem Dpn I-Verdau widersteht (da die synthetische DNA nicht methyliert ist). Nach der Dpn I-Behandlung wird das resultierende mutierte Plasmid durch Transformation kompetenter NZYStar-Zellen wiederhergestellt. Eine schematische Darstellung des Mutageneseprotokolls ist in Abbildung 1 zu sehen. DNA, die aus Escherichia coli-Stämmen, einschließlich JM101 und SCS110, isoliert wurde, ist keine geeignete Vorlage für die Mutagenesereaktion. Bestandteile - Supreme NZYProof 2x farbloser Master-Mix - Dpn I (10 U/µL) - Kontroll-Plasmid - Mutagenese Kontroll-Primer-Mix - Kompetente Zellen Kontrollplasmid (0,1 ng/µL) (*) (*) nur im MB44702-Kit enthalten Mehr Information Versandbedingungen Trockeneis Anwendung Ortsgerichtete Mutagenese Merkmale Mutagenese von Plasmiden <15 kb; schnell Produkt-Kategorie DNA-Klonierung & Mutagenese