NZY RNase H ist ein Schlüsselenzym bei der Synthese von cDNA. Es hydrolysiert spezifisch RNA in RNA:cDNA-Komplexen und verbessert so die Empfindlichkeit. Das Enzym baut keine einzel- oder doppelsträngige DNA oder unhybridisierte RNA ab.
Einzelheiten
NZY RNase H ist eine rekombinante Endoribonuklease, die aus einem Escherichia coli-Stamm gereinigt wurde, der das klonierte RNase H-Gen (rnh) überexprimiert. Das Enzym hydrolysiert spezifisch die Phosphodiesterbindungen von RNA, die an DNA hybridisiert ist, um 5'-phosphatterminierte Oligoribonukleotide und einzelsträngige DNA zu erzeugen. RNase H baut weder einzel- und doppelsträngige DNA noch unhybridisierte RNA ab. Sie ist ein Schlüsselenzym bei der Entfernung von mRNA nach der cDNA-Erststrangsynthese. Die Behandlung von cDNA mit RNase H vor der PCR kann die Empfindlichkeit verbessern, da cDNA-RNA-Hybride in der Amplifikationsreaktion die Bindung der Amplifikationsprimer verhindern können. Eine RNase-H-Behandlung ist häufig erforderlich, wenn längere cDNA-Ziele in voller Länge amplifiziert werden.
Bestandteile
- NZY RNase H (E. coli) (5 U/μL)
- Reaktionspuffer (10x)
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Versandbedingungen
Trockeneis
Format
Enzym/Protein, Flüssigkeit
Produktkategorie
RNasen
Reaktionstemperatur
37 °C
Hitze Inaktivierung
65 °C
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