Das NZY M-MuLV First-Strand cDNA Synthesis Kit ist ein System, das alle notwendigen Komponenten für die Synthese von First-Strand cDNA enthält, mit Ausnahme der Template-RNA.
Einzelheiten
Das NZY M-MuLV First-Strand cDNA Synthesis Kit, separate Oligos, ist ein System, das alle notwendigen Komponenten für die Synthese von cDNA-Erststrängen, mit Ausnahme der Template-RNA, enthält. Zufällige Hexamere und Oligo(dT)18-Primer werden in separaten Röhrchen geliefert, damit Sie bequem den passenden Primer für Ihre Reverse-Transkriptionsreaktion auswählen können. Die resultierende einzelsträngige cDNA eignet sich für die Verwendung in der quantitativen Reverse-Transkriptions-PCR (RT-qPCR) in Echtzeit. Das NZY M-MuLV First-Strand cDNA Synthesis Kit, separate Oligos, wurde entwickelt, um eine hohe Ausbeute an cDNA-Produkten in voller Länge zu erzielen und die Sensitivität in der RT-qPCR zu erhöhen. Das Ausgangsmaterial kann von 10 pg bis zu 5 µg Gesamt-RNA reichen. Neben zufälligen Hexameren und Oligo(dT)18-Primern enthält das Kit den NZYRT 2× Master Mix, ohne Oligos, der dNTPs, MgCl2 und einen optimierten RT-Puffer enthält; 10× Annealing Buffer und NZYM-MuLV RT Enzyme Mix. NZYM-MuLV RT Enzyme Mix enthält sowohl NZY M-MuLV Reverse Transcriptase (RNase H minus) als auch NZY Ribonuclease Inhibitor, um die RNA vor dem Abbau durch Ribonuclease-Kontamination zu schützen. RNase H (aus E. coli) wird in einem separaten Röhrchen bereitgestellt, um die RNA-Vorlage in cDNA-RNA-Hybriden nach der cDNA-Erststrang-Synthese gezielt abzubauen. Dieses Verfahren verbessert die Empfindlichkeit der nachfolgenden RT-qPCR-Reaktionen, da die PCR-Primer leichter an die cDNA binden.
Bestandteile
- NZYM-MuLV RT-Enzym-Mix
- NZYRT 2x Master Mix, ohne Oligos
- 10× Annealing-Puffer
- Zufällige Hexamer-Mischung (50 ng/µL)
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