Das NZY First-Strand cDNA Synthesis Kit, separate Oligos, ist ein System, das alle notwendigen Komponenten für die Synthese von First-Strand cDNA enthält. Das Kit ermöglicht die Reaktion bei hohen Temperaturen, was bei der Herstellung schwieriger und komplexer RNA von Vorteil ist.
Einzelheiten
Das NZY First-Strand cDNA Synthesis Kit, separate Oligos, ist ein System, das alle notwendigen Komponenten für die Synthese von cDNA-Erststrängen enthält, mit Ausnahme der Template-RNA. Zufällige Hexamere und Oligo(dT)18-Primer werden in separaten Röhrchen geliefert, damit Sie bequem den passenden Primer für Ihre Reverse-Transkriptionsreaktion auswählen können. Die resultierende einzelsträngige cDNA eignet sich für die Verwendung in der quantitativen Reverse-Transkriptions-PCR (RT-qPCR) in Echtzeit. Das NZY First-Strand cDNA Synthesis Kit, separate Oligos, ist so formuliert, dass eine hohe Ausbeute an cDNA-Produkten in voller Länge erzielt und die Sensitivität in der RT-qPCR erhöht wird. Das Ausgangsmaterial kann von 10 pg bis zu 5 µg Gesamt-RNA reichen. Neben zufälligen Hexameren und Oligo(dT)18-Primern enthält das Kit den NZYRT 2× Master Mix, ohne Oligos, der dNTPs, MgCl2 und einen optimierten RT-Puffer enthält; 10× Annealing Buffer und NZYRT Enzyme Mix. Der NZYRT-Enzymmix enthält sowohl NZY Reverse Transkriptase (RNase H minus) als auch NZY Ribonuklease-Inhibitor, um die RNA vor dem Abbau durch Ribonuklease-Kontamination zu schützen. RNase H (aus E. coli) wird in einem separaten Röhrchen bereitgestellt, um die RNA G604template in cDNA-RNA-Hybriden nach der cDNA-Erststrang-Synthese spezifisch abzubauen. Dieses Verfahren verbessert die Empfindlichkeit der nachfolgenden RT-qPCR-Reaktionen, da die PCR-Primer leichter an die cDNA binden.
Bestandteile
- NZYRT-Enzymmischung
- NZYRT 2x Master Mix, ohne Oligos
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