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PRINZIP DES ASSAYS -
Der Human-Endostatin-ELISA-Kit basiert auf der quantitativen Sandwich-Enzyme-Linked-Immunosorbent-Assay-Technik zur Messung der Konzentration von Human-Endostatin in den Proben. Ein für humanes Endostatin spezifischer Antikörper wurde auf Mikrovertiefungen immobilisiert. Der Standard oder die Proben werden in die Vertiefungen pipettiert, gefolgt von der Zugabe des für Endostatin spezifischen biotingebundenen Nachweisantikörpers. Das vorhandene Endostatin wird nach der ersten Inkubation durch den immobilisierten Antikörper und den Nachweisantikörper gebunden. Nach Entfernung aller nicht gebundenen Substanzen wird Streptavidin-HRP für eine zweite Inkubation zugegeben. Nach dem Waschen reagiert die Substratlösung mit HRP und die Farbe entwickelt sich im Verhältnis zur Menge des durch den immobilisierten Antikörper gebundenen Endostatins. Die Farbentwicklung wird durch Zugabe von Säure gestoppt, und der Wert der optischen Dichte wird mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen.
Beschreibung
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Endostatin ist ein 20 kDa großes proteolytisches Fragment der C-terminalen, nicht kollagenen (NC1) Domäne des Typ-XVIII-Kollagens, das ein endogener Angiogenese-Inhibitor ist. Ursprünglich wurde es als ein von Hämangioendotheliomzellen der Maus produzierter Faktor identifiziert, der spezifisch die Proliferation von Endothelzellen und die Angiogenese hemmen kann. Es hemmt das Tumorwachstum und beeinträchtigt die Blutgefäßreifung bei der Wundheilung. Endostatin spielt eine wichtige Rolle bei der Adhäsion von Endothelzellen und der Organisation des Zytoskeletts.
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