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PRINZIP DES ASSAYS -
Der Human-GDNF-ELISA-Kit basiert auf der quantitativen Sandwich-Enzyme-Linked-Immunosorbent-Assay-Technik zur Messung der Konzentration von Human-GDNF in den Proben. Ein Antikörper, der spezifisch für humanes GDNF ist, wurde auf Mikrovertiefungen immobilisiert. Standard- oder Proben werden in die Vertiefungen pipettiert, gefolgt von der Zugabe eines für GDNF spezifischen biotingebundenen Nachweisantikörpers, und vorhandenes GDNF wird nach der ersten Inkubation durch den immobilisierten Antikörper und den Nachweisantikörper gebunden. Nach Entfernung aller nicht gebundenen Substanzen wird Streptavidin-HRP für eine zweite Inkubation zugegeben. Nach dem Waschen reagiert die Substratlösung mit HRP und die Farbe entwickelt sich im Verhältnis zur Menge des durch den immobilisierten Antikörper gebundenen GDNF. Die Farbentwicklung wird durch Zugabe von Säure gestoppt, und der Wert der optischen Dichte wird mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen.
Beschreibung -
Der Glial Cell Line-derived Neurotrophic Factor (GDNF) ist ein neurotropher Faktor, der nachweislich das Überleben verschiedener neuronaler Subpopulationen sowohl im zentralen als auch im peripheren Nervensystem in verschiedenen Phasen ihrer Entwicklung fördert. Der funktionelle menschliche GDNF-Ligand ist ein Disulfid-verknüpftes Homodimer, das aus zwei 15 kDa großen Polypeptidketten, den so genannten Monomeren, besteht. GDNF wird von Sertoli-Zellen, Typ-1-Astrozyten, Schwann-Zellen, Neuronen, Pinealozyten und Skelettmuskelzellen produziert.
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