Ebnet Ihnen den Weg zur funktionalen Analyse einer spezifischen Forschungsfrage.
Verwendungszweck
Dieses FluoroSpot Path Kit ist für die Zählung von Zellen bestimmt, die als Reaktion auf CMV-Peptide humanes IFN-γ und IL-2 sezernieren, unter Verwendung des FluoroSpot Assays. Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren.
Zusammensetzung des Peptidpools
Der CMV-Peptidpool enthält 42 Peptide, die von CMV stammen. Die im Peptidpool vertretenen Antigene sind pp50, pp65, IE1, IE2 und Hüllenglykoprotein B. Von den enthaltenen Peptiden sind 28 auf MHC-Klasse I und 14 auf MHC-Klasse II beschränkt.
Leistung
Menschliche PBMC (250.000 Zellen/Vertiefung) wurden über Nacht in Abwesenheit oder Anwesenheit des CMV-Peptidpools für menschliche CD4- und CD8-T-Zellen (Mabtech) inkubiert, und die Anzahl der Zellen, die IFN-γ und/oder IL-2 sezernieren, wurde mittels FluoroSpot analysiert. Es wurden sowohl einzelne Zytokin-sezernierende Zellen als auch doppelt sezernierende Zellen bestimmt. Spot Center wurde verwendet, um Spots von doppelt sezernierenden Zellen zu identifizieren, die in einer Bildüberlagerung von LED490, FITC (IFN-γ) und LED550,Cy3 (IL-2) sichtbar gemacht wurden. Die Spotanalyse wurde mit Mabtech IRIS durchgeführt.
IFN-γ
Beschreibung des Analyten
Interferon-γ (IFN-γ) ist das einzige Interferon vom Typ II. Dieses proinflammatorische Zytokin wird von aktivierten T-Zellen und NK-Zellen ausgeschüttet. Es aktiviert Makrophagen und Endothelzellen und reguliert Immunantworten, indem es auf APCs, T-Zellen und B-Zellen einwirkt. Die Produktion von IFN-γ durch T-Helferzellen und zytotoxische T-Zellen ist ein Kennzeichen des Th1-Phänotyps. Eine hohe IFN-γ-Produktion ist daher in der Regel mit einer wirksamen Abwehr des Wirts gegen intrazelluläre Krankheitserreger verbunden.
Alternative Namen - Interferon-γ, Interferon-Gamma, IFN-γ, IFN-Gamma, IFN-g, IFNg, IFG, IFI, IMD69
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