Testkit für Forschungszwecke FSP-05R-S1-1

ImmunoglobulineIgMImmunglobulinklasse G

Ebnet Ihnen den Weg zur funktionalen Analyse einer spezifischen Forschungsfrage. Verwendungszweck Dieses FluoroSpot Path Kit ist für die Zählung von B-Zellen bestimmt, die menschliches IgG als Reaktion auf SARS-CoV-2 (Spike) unter Verwendung des FluoroSpot-Tests sezernieren. B-Zellen, die unabhängig von der Antigenspezifität IgG sezernieren (Gesamt-IgG), können ebenfalls gezählt werden. Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren. Für Gedächtnis-B-Zellen empfehlen wir eine Vorstimulation mit R848 und rekombinantem humanem IL-2 (beides im Lieferumfang enthalten). Leistung Menschliche PBMC von einem COVID-19-Rekonvaleszenten wurden drei Tage lang mit R848+IL-2 (stimuliert Gedächtnis-B-Zellen) in Röhrchen inkubiert. Die Zellen wurden dann ausgiebig gewaschen und auf eine FluoroSpot-Platte (250.000 Zellen/Vertiefung) gegeben, die mit Anti-Human-IgG-MAbs beschichtet war. Spike-spezifische IgG-Spots wurden mit Spike-GAL, d. h. rekombinantem Spike-Protein mit einem GAL-Peptid-Tag, und anschließend mit Anti-GAL-490 nachgewiesen. Die Spots wurden mit Mabtech IRIS analysiert. Beschreibung des Analyten - Immunglobulin G (IgG) ist der am häufigsten vorkommende Ig-Isotyp im Serum und macht etwa 80 % aller Serum-Immunglobuline aus. Beim Menschen gibt es vier Unterklassen von Immunglobulin G, mit den höchsten Serumkonzentrationen von IgG1, gefolgt von IgG2, IgG3 und IgG4. Bei Mäusen werden die IgG-Unterklassen als IgG1, IgG2a/c, IgG2b und IgG3 definiert. Das IgG-Molekül besteht aus zwei schweren und zwei leichten Ketten (κ oder λ), was zu einem Molekül mit zwei Armen für die Antigenbindung führt. Bei einer typischen Immunreaktion auf Antigene werden nach der anfänglichen IgM-Antwort hohe Mengen an IgG-Antikörpern gebildet.