COVID-19-Testkit FSP-05R-RS1-1

für ForschungszweckeImmunoglobulineImmunglobulinklasse G

Ebnet Ihnen den Weg zur funktionalen Analyse einer spezifischen Forschungsfrage. Verwendungszweck Dieses FluoroSpot Path Kit ist für die Zählung von B-Zellen bestimmt, die menschliches IgG als Reaktion auf SARS-CoV-2 (Spike und RBD) unter Verwendung des FluoroSpot Assays sezernieren. B-Zellen, die unabhängig von der Antigenspezifität IgG sezernieren (Gesamt-IgG), können ebenfalls gezählt werden. Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren. Für Gedächtnis-B-Zellen empfehlen wir eine Vorstimulation mit R848 und rekombinantem humanem IL-2 (beides im Lieferumfang enthalten). Leistung Menschliche PBMC von einem COVID-19-Rekonvaleszenten wurden drei Tage lang mit R848+IL-2 (stimuliert Gedächtnis-B-Zellen) in Röhrchen inkubiert. Die Zellen wurden dann ausgiebig gewaschen und auf eine FluoroSpot-Platte (250.000 Zellen/Vertiefung) gegeben, die mit Anti-Human-IgG-MAbs beschichtet war. Spike-spezifische IgG-Spots wurden mit Spike-GAL, d. h. rekombinantem Spike-Protein mit einem GAL-Peptid-Tag, und anschließend mit Anti-GAL-490 nachgewiesen. RBD-spezifische Spots wurden mit RBD-WASP, d. h. rekombinantem Receptor Binding Domain-Protein mit einem WASP-Peptid-Tag, und anschließend mit Anti-WASP-640 nachgewiesen. Die Spots wurden mit Mabtech IRIS analysiert. Beschreibung des Analyten - Immunglobulin G (IgG) ist der am häufigsten vorkommende Ig-Isotyp im Serum und macht etwa 80 % aller Serum-Immunglobuline aus. Beim Menschen gibt es vier Unterklassen von Immunglobulin G, mit den höchsten Serumkonzentrationen von IgG1, gefolgt von IgG2, IgG3 und IgG4. Bei Mäusen werden die IgG-Unterklassen als IgG1, IgG2a/c, IgG2b und IgG3 definiert. Das IgG-Molekül besteht aus zwei schweren und zwei leichten Ketten (κ oder λ), was zu einem Molekül mit zwei Armen zur Antigenbindung führt.