Acridinorange/Propidiumjodid-Färbung ist ein Zelllebensfähigkeitsfarbstoff, der lebensfähige kernhaltige Zellen grün und nicht lebensfähige kernhaltige Zellen rot fluoreszierend erscheinen lässt. Acridinorange/Propidiumiodid-Färbung kann zur Bewertung der Zelllebensfähigkeit mit den automatischen Fluoreszenz-Zellzählern der LUNA™-Familie verwendet werden.
Acridinorange durchdringt lebensfähige Zellen und bindet an Nukleinsäuren. Die Bindung an dsDNA lässt Acridinorange grün fluoreszieren, die Bindung an ssDNA oder RNA lässt es rot fluoreszieren. Propidiumjodid bindet an Nukleinsäuren. Da Propidiumjodid intakte Zellmembranen nicht durchdringen kann, wird es von nicht lebensfähigen Zellen und Zellen mit beschädigten Membranen aufgenommen. Sobald es an Nukleinsäuren gebunden ist, erhöht sich seine Fluoreszenz um das 20-30fache und lässt die Zelle rot fluoreszieren. Aufgrund des Förster-Resonanz-Energie-Transfers (FRET) absorbiert das Propidiumjodid-Signal das Acridinorange-Signal in nicht lebensfähigen Zellen, so dass keine doppelt positiven Ergebnisse erzielt werden.
Spezifikationen
Zellpermeabilität - Membrandurchlässig (Acridinorange)
Membranen undurchlässig (Propidiumjodid)
Anregung/Emission - 500/526nm (Acridinorange)
533/617nm (Propidiumjodid)
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