Humanes Choriongonadotropin (hCG) ist ein Glykoprotein-Hormon, das normalerweise während der Schwangerschaft von der Plazenta produziert wird. Das hCG-Molekül besteht aus zwei kombinierten, unähnlichen Untereinheiten, die als Alpha und Beta bezeichnet werden. Die Beta-Untereinheit mit einem Molekulargewicht von ca. 30.000 Dalton verleiht dem gesamten hCG-Molekül aufgrund seiner einzigartigen Aminosäuresequenz und seines Inhalts biologische und immunologische Spezifität. Die Alpha-Untereinheit mit einem Molekulargewicht von etwa 18.000 Dalton ist im Wesentlichen identisch mit der Alpha-Untereinheit der Hypophysen-Glykoprotein-Hormone: luteinisierendes Hormon (LH), follikelstimulierendes Hormon (FSH) und thyreoideastimulierendes Hormon (TSH).
Der quantitative hCG-Test basiert auf einem enzymgekoppelten Festphasen-Immunosorbent-Assay (ELISA). Das Testsystem verwendet einen monoklonalen Maus-Anti--hCG-Antikörper für die Festphasen-Immobilisierung (Mikrotitervertiefungen) und einen monoklonalen Maus-Anti-β-hCG-Antikörper in der Antikörper-Enzym-Konjugatlösung (Meerrettichperoxidase). Die Testprobe (Serum) wird in die mit -hCG-Antikörper beschichteten Mikrotitervertiefungen gegeben und mit dem Nullpuffer 30 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert. Wenn hCG in der Probe vorhanden ist, verbindet es sich mit dem Antikörper in den Vertiefungen. Anschließend werden die Vertiefungen gewaschen, um alle Reste der Probe zu entfernen, und der mit Meerrettichperoxidase markierte monoklonale β-hCG-Antikörper (Konjugat) wird hinzugefügt. Das Konjugat bindet immunologisch an das hCG in den Vertiefungen, wodurch die hCG-Moleküle zwischen der festen Phase und den enzymatisch gebundenen Antikörpern eingeschlossen werden. Nach einer 15-minütigen Inkubation bei Raumtemperatur werden die Vertiefungen mit Wasser gewaschen, um ungebundene Antikörper zu entfernen.
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