Harnstoff wird durch Urease zu Ammoniak und Kohlendioxid hydrolysiert. Das Ammoniak wird durch Glutamat-Dehydrogenase (GlDH) in Gegenwart von NADH und Oxoglutarat in Glutamat umgewandelt.
Die Reaktion wird kinetisch bei 340 nm überwacht, und zwar durch die Abnahme der Absorptionsrate, die sich aus der Oxidation von NADH zu NAD+ ergibt und proportional zur Konzentration des in der Probe vorhandenen Harnstoffs ist.
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