Harnstoff wird durch Urease zu Ammoniak und Kohlendioxid hydrolysiert. Das entstehende Ammoniak reagiert mit Alkalihypochlorit und Natriumsalicylat in Gegenwart von Natriumnitroprussid als Kopplungsmittel und ergibt ein grünes Cromophor. Die Intensität der gebildeten Farbe ist proportional zur Konzentration des Harnstoffs in der Probe.
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