Bei dieser Methode zur Messung des Gesamtcholesterins im Serum werden drei Enzyme eingesetzt: Cholesterinesterase (CE), Cholesterinoxidase (CO) und Peroxidase (POD). In Anwesenheit des erstgenannten Enzyms wird das Gemisch aus Phenol und 4-Aminoantipyrin (4-AA) durch Wasserstoffperoxid kondensiert und bildet einen Chinonimin-Farbstoff, der proportional zur Cholesterinkonzentration in der Probe ist.
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