Die Methode basiert auf der Hydrolyse von α-Naphthylphosphat bei einem pH-Wert von 5,0 durch saure Phosphatase (ACP), wobei α-Naphthol und anorganisches Phosphat entstehen. Das Pentandiol wirkt als Phosphat
akzeptor, der die Empfindlichkeit der Reaktion erhöht.
Das α-Naphthol reagiert mit Fast Red TR, um einen farbigen Komplex zu erzeugen, der direkt proportional zur Aktivität der ACP in der Probe ist.
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