Die T7-Endonuklease I erkennt und spaltet nicht perfekt angepasste DNA, kreuzförmige DNA-Strukturen, Holliday-Strukturen oder -Verzweigungen, Heteroduplex-DNA und, langsamer, eingekerbte doppelsträngige DNA. Die Spaltstelle ist die erste, zweite oder dritte Phosphodiesterbindung, die 5' zur Fehlpaarung liegt.
Einführung
Die Magigen T7-Endonuklease kann zum Nachweis von Genmutationen, SNP-, TALEN- oder CRISPR/Cas9-Mutanten, zur Identifizierung fehlangepasster DNA und zur Auflösung von Vier-Wege-Kreuz-DNA oder verzweigter DNA verwendet werden. Nachweis von Heteroduplex oder Spaltung von DNA; sie wird zum zufälligen Schneiden linearer DNA für Shotgun-Klonierung usw. verwendet.
Einheit Definition
Die Menge an Enzym, die erforderlich ist, um pUC (AT)* mit einer kreuzförmigen Struktur von mindestens 90 % in eine lineare Struktur von mehr als 90 % in einem 50 μl-Reaktionssystem bei 37 °C für 1 Stunde umzuwandeln, wird als eine Aktivitätseinheit definiert.
Produktmerkmale
Die T7-Endonuklease I ist ein substratstrukturell selektives Enzym, das für verschiedene DNA-Substrate unterschiedliche Spaltaktivitäten aufweist. Daher ist es beim Schneiden eines bestimmten Substrats notwendig, die Menge des Enzyms und die Reaktionszeit zu untersuchen und zu kontrollieren.
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