2× plus Mischung ist eine vorgemischte, gebrauchsfertige Lösung, die Taq plus DNA-Polymerase, dNTPs, Magnesium2+ enthält und Reaktions-Puffer bei optimalen Konzentrationen für leistungsfähige Verstärkung von DNA-Schablonen durch PCR, muss nur Zündkapseln und Schablone DNA addieren. Diese vorgemischte Formulierung spart Zeit und verringert die Verschmutzung wegen der weniger pipettierenden Schritte, die für PCR-Einrichtung erfordert werden. Sie trägt auch zur höheren Empfindlichkeit bei, indem sie Vergrößerer addieren.
Taq plus DNA-Polymerase, eine Kombination von zwei hitzebeständigen DNA-Polymerasen, Taq und Pfu, mischt das processivity von Taq mit der hohen Wiedergabetreue von Pfu. Deshalb formulierte dieses besonders Taq plus DNA-Polymerase erlaubt Verstärkung von Highfidelity und von längeren Schablonen als die Einzelenzymformulierungen. Es ist auch eine bessere Wahl für die Verstärkung der komplexen Schablone, wie Gaschromatographie-reiche Schablone. Die Verlängerungsrate ist 3kb/min. Sie kann DNA-Ziel Kb bis 20 (einfache Schablone) verstärken. Pcr-Produkte, die durch Taq-Plus verstärkt werden, sind Mischung von Stumpfenden und 3' DAüberhänge.
Zusammensetzung der 2× Plusmischung
0.4U/μl Taq DNA-Polymerase, 0.04U/μl Pfu DNA-Polymerase, Puffer PCR-2×, 0.4mM dNTPs, 4mM MgSO4, 0,02% Bromophenolblau.
Plusmischungspuffer ist eine eigene Formulierung, die für robuste Leistung in PCR optimiert wird.
Anwendungen
• Langer PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Hoher reproduzierbarer PCR für komplexe Schablonen
• Hoher Durchsatz PCR für komplexe Schablonen
• Generation von PCR-Produkten für TA-Klonen