Reagenz / als Lösung NI™

Albumin aus RinderserumLaborProtein

Protocols.io bietet eine interaktive Version dieses Protokolls, in der Sie Optimierungen entdecken und mit der Forschungsgemeinschaft teilen können. Ein hochempfindlicher, kolorimetrischer Proteintest, der die Interferenz üblicher Laborwirkstoffe in Proteinlösungen überwindet und minimale Protein-zu-Protein-Abweichungen aufweist. Der Assay wird durch die Anwesenheit gängiger Laborwirkstoffe wie Reduktionsmittel, Chelatbildner, Detergenzien, Amine, Zucker, Chaotrope, Salze, Medikamente, Antibiotika, Kobalt und andere gängige Laborwirkstoffe nicht beeinträchtigt (siehe Tabellen 1 und 2). Der NI™-Protein-Assay besteht aus zwei einfachen Schritten: Universal Protein Precipitating Agent (UPPA™) wird zu den Proteinlösungen hinzugefügt, um das Gesamtprotein schnell zu fällen. Das Protein wird durch Zentrifugation immobilisiert und störende Substanzen im Überstand werden verworfen. Die Proteinkonzentration wird durch Mischen mit einer alkalischen Lösung bestimmt, die eine bekannte Kupfersalzkonzentration enthält; die Kupferionen binden sich an das Peptidrückgrat, und der Assay misst die ungebundenen Kupferionen (siehe Abbildung 2). Der Assay ist unabhängig von den Proteinseitenketten und minimiert die Schwankungen von Protein zu Protein (siehe Abbildung 3). Die Farbdichte ist umgekehrt proportional zur Menge des Proteins. Der Assay wird mit einem herkömmlichen Proteinstandard aus Rinderserumalbumin (BSA) oder einem nicht tierischen Proteinstandard geliefert. Merkmale Lineare Reaktion 0,5µg-50µg Protein Geringer Probenbedarf, nur 1-50µl Unbeeinflusst von Nicht-Protein-Chemikalien und -Agenzien Protokolldauer: ~30 Minuten Lange Haltbarkeitsdauer Anwendungen Schätzung von Proteinen bei der Proteinreinigung, Elektrophorese, Zellbiologie, Molekularbiologie und anderen Forschungsanwendungen.