Bacterial PE LB™ wurde für die Extraktion von löslichen Proteinen und Einschlusskörpern aus bakteriellen Zellen entwickelt. Es ist eine patentrechtlich geschützte Verbesserung der Lyse auf Lysozym-Basis, die die Extraktion löslicher Proteine und die gleichzeitige Entfernung von Nukleinsäuren (DNA & RNA) ermöglicht, die während der Zelllyse freigesetzt werden. Die bakterielle PE LB™-Lyse verhindert den Aufbau von Viskosität und ermöglicht eine effektive Klärung bei geringerer Zentrifugalkraft.
Dieser Kit wird mit einem optionalen Protokoll für die Bildung von Sphäroplasten und die Entfernung des lytischen Enzyms (Lysozym) vor der Lyse und Extraktion der bakteriellen Proteine geliefert. Bacterial PE LB™ basiert auf organischen Puffersubstanzen und verwendet ein mildes nicht-ionisches Detergens und eine proprietäre Kombination verschiedener Salze und Wirkstoffe zur Verbesserung der Extraktion und Stabilität der Proteine. Je nach Anwendung können dem Bacterial PE LB™ zusätzliche Mittel wie Reduktionsmittel, Chelatbildner und ein Cocktail aus Proteaseinhibitoren zugesetzt werden. Dieses Reagenz wurde für die Verwendung mit mehreren weit verbreiteten Bakterien, einschließlich E. coli-Stämmen, getestet.
Bacterial PE LB™ ist mit den meisten Downstream-Anwendungen kompatibel, einschließlich der Durchführung verschiedener Chromatographie- und Gelelektrophoreseanwendungen sowie Proteinfaltungsprozessen. Bacterial PE LB™ ist auch für die Proteinschätzung mit dem NI™-Protein-Assay (Non-Interfering Protein Assay)™ kompatibel.
Für die bakterielle Lyse eignen sich die Kits zur Extraktion löslicher Proteine aus etwa 30 g feuchten Zellpellets pro 100 ml Bacterial PE LB™. Wenn die Kits für die Extraktion löslicher Proteine aus Sphäroplasten verwendet werden, eignen sie sich für ca. 9 g feuchte Zellpellets pro 25 ml mitgeliefertem Bakteriensuspensionspuffer.
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