Ein geeigneter Proteinauflösungspuffer für die 2D-Analyse muss die Proteine effektiv auflösen, ohne die native Ladung der Proteine zu verändern. Auf Harnstoff basierende Solubilisierungspuffer solubilisieren Proteine effektiv, können jedoch die native
ladung der Proteine aufgrund von Carbamylierung verändern. Harnstoff befindet sich im Gleichgewicht mit Ammoniumcyanat, das α- und ε-Aminogruppen verändert, was zu Änderungen des isoelektrischen Punkts von Proteinen und damit zu artefaktischen Ergebnissen führt.
Eine Möglichkeit, das Risiko der Carbamylierung zu minimieren, besteht darin, die harnstoffbasierten Reagenzien vor jeder Verwendung frisch zuzubereiten. G-Biosciences hat 2D-Xtract™ entwickelt, einen trockenen, vorgemischten und gebrauchsfertigen Solubilisierungspuffer auf Harnstoffbasis.
Fügen Sie einfach ein entsprechendes Volumen des mitgelieferten Rehydrationspuffers zum trockenen Puffer hinzu und verwenden Sie ihn dann zur Solubilisierung von Proteinen, um Zeit zu sparen und die Qualität der IEF/2D-Gelelektrophorese zu verbessern.
2D-Xtract™ ist auch für die Verwendung als Rehydrationspuffer für IPG-Streifen vorgesehen.
2D-Xtract™ basiert auf unserer erfolgreichen Reihe von FOCUS™-Extraktionspuffern. Während der Entwicklung der FOCUS™-Extraktionspuffer wurden optimale Konzentrationen von kritischen Wirkstoffen, Puffer- und Stabilisierungsmitteln, einschließlich Harnstoff, Thioharnstoff, CHAPS und nicht-detergenzienhaltigen Sulfobetainen, ermittelt, um eine optimale Proteinextraktion und eine verbesserte Spotauflösung für die 2D-Gelanalyse zu erzielen. 2D-Xtract™ verfügt über optimierte Konzentrationen von Harnstoff, Thioharnstoff, CHAPS und nicht-detergenziellem Sulfobetain (ND SB) 201.
Merkmale
Bequemer und einfach zu verwendender Extraktionspuffer.
Keine Vorbereitung erforderlich, einfach hydratisieren und verwenden.
Verhindert harnstoffinduzierte Protein-Carbamylierung.
Verhindert die Verschwendung von unbenutzten Reagenzien.
Keine artefaktischen Proteinbanden aufgrund von Staub und menschlicher Hautkontamination.
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