Die Dichte der mononukleären Zellen (Lymphozyten und Monozyten) im peripheren Blut liegt zwischen 1,075-1,090g/ml, was sich von der Dichte der roten Blutkörperchen, der mehrkernigen Leukozyten und der Thrombozyten unterscheidet.Die Dichten der roten Blutkörperchen und der Granulozyten sind relativ groß (etwa 1.die Dichte der roten Blutkörperchen und der Granulozyten ist relativ hoch (ca. 1,092 g/ml), und die Dichte der Blutplättchen liegt zwischen 1,030 und 1,035 g/ml. Daher wird das humane Lymphozyten-Separationsmedium verwendet, um einen gewissen Dichtegradienten zu erzeugen, und das verdünnte Vollblut wird gleichmäßig auf das Separationsmedium aufgebracht. Nach der Zentrifugation sinken die Erythrozyten und Granulozyten aufgrund ihrer hohen Dichte auf den Boden des Röhrchens; da ihre Dichte kleiner oder gleich der Dichte des Trennmediums ist, befinden sich die Lymphozyten und Monozyten an der Oberfläche des Trennmediums. Es kann auch eine kleine Menge von Zellen im Trennmedium suspendiert sein. Durch Absaugen der Zellen an der Oberfläche des Trennmediums können mononukleäre Zellen aus dem peripheren Blut abgetrennt werden.
Diese Produktreihe hat eine Reihe von Vorteilen wie schnelle und einfache Anwendung, keine Zytotoxizität, hohe Zellausbeute und gute Vitalität.
Fehlersuche
Die optimale Trennungstemperatur ist (20±5)℃, darüber hinaus wird der Trenneffekt beeinträchtigt. Wärmen Sie das Trennmedium auf Raumtemperatur (20±5℃) vor und schütteln Sie es vor Gebrauch leicht. Vermeiden Sie die Verwendung des Trennmediums direkt aus dem Kühlschrank.
Das isotonische Medium (PBS oder 0,9% NaCl), das zur Verdünnung von antikoaguliertem Blut verwendet wird, sollte steril sein und kann durch RPMI-1640-Medium ersetzt werden.
eine 1:1-Blutverdünnung kann die Gerinnung der Erythrozyten verringern und die Menge der gewonnenen Lymphozyten erhöhen.
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