Das Muse® MAPK Activation Dual Detection Kit gehört zu einer Reihe von Produkten, die ein Paar von Antikörpern enthalten, die an dasselbe Protein binden; ein Antikörper weist die gesamte Proteinexpression nach, der andere die phosphorylierte Form desselben Ziels.
Die Zwei-Parameter-Analyse ermöglicht eine spezifische Detektion der Phosphorylierung und eliminiert falsch-positive Ergebnisse, wodurch das Signal-Rausch-Verhältnis verbessert wird. Das Muse MAPK Activation Dual Detection Kit enthält zwei direkt konjugierte Antikörper - einen phospho-spezifischen Anti-ERK1/2 (Thr202/Tyr204, Thr185/Tyr187)-Phycoerythrin-Antikörper und einen Anti-ERK1/2-PECy5-konjugierten Antikörper - zur Messung der Gesamtmenge an ERK. Dieses Zweifarben-Kit wurde entwickelt, um die MAPK-Phosphorylierung im Verhältnis zur gesamten MAPK-Expression in einer bestimmten Zellpopulation zu messen. Auf diese Weise können die Konzentrationen des gesamten und des phosphorylierten Proteins gleichzeitig in derselben Zelle gemessen werden, was zu einer normalisierten und genauen Messung der MAPK-Aktivierung nach der Stimulation führt. Außerdem bestätigt die gleichzeitige Messung von Gesamt- und Phospho-ERK1/2 die Zielspezifität des Phosphorylierungsvorgangs. Ein im Multiplexverfahren durchgeführtes Gesamt- und Phospho-Antikörper-Duo ermöglicht eine verbesserte und zuverlässigere Bestimmung des Phospho:Gesamt-Verhältnisses in einer gemischten Population.
Alle Muse Activation Dual Detection Kits sind für die Verwendung mit dem Guava® Muse® Zellanalysegerät optimiert und konzipiert. Das im Kit enthaltene Antikörperpaar wurde sorgfältig titriert, um die gleichzeitige Messung von Gesamt- und Phospho-ERK1/2 am selben Protein für eine genaue Bestimmung des Proteingehalts und der Aktivierung zu gewährleisten.
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