Das Muse® Multi-Color DNA Damage Kit - 50 Tests (Artikelnummer: MCH200107) wurde entwickelt, um Forschern eine schnelle und einfache Möglichkeit zu bieten, die Aktivierung von ATM und H2A.X mit dem Guava® Muse® Zellanalysegerät nachzuweisen. Das Kit wurde mit dem DNA-schädigenden Reagenz Etoposid an HeLa-Zellen als Modellsystem optimiert, kann aber auch mit anderen menschlichen Zelllinien verwendet werden, um sowohl die physikalischen als auch die chemischen Faktoren zu untersuchen, die eine DNA-Schadensreaktion über den ATM-abhängigen Signalweg auslösen können. Die mit dem Muse-System erzeugten Daten liefern statistische Werte zur Messung der:
Prozentsatz der negativen Zellen (z. B. keine DNA-Schäden)
Prozentualer Anteil der ATM-aktivierten Zellen
Prozentsatz der aktivierten H2A.X-Zellen
Prozentualer Anteil der DNA-Doppelstrangbrüche (doppelte Aktivierung von ATM und H2A.X)
Das Muse Multi-Color DNA Damage Kit enthält zwei direkt konjugierte Antikörper - einen Phospho-spezifischen ATM (Ser1981)-PE und einen Phospho-spezifischen Histon H2A.X PECy5 konjugierten Antikörper - um das Ausmaß der DNA-Schädigung in Testproben zu messen. Dieser Zweifarben-Kit ist so konzipiert, dass der Phosphorylierungszustand von ATM und Histon H2A.X gleichzeitig durch eine Durchflussanalyse nachgewiesen werden kann. Die zweifarbige Analyse der ATM- und Histon H2A.X-Aktivierung im Multiplexverfahren bietet eine zuverlässigere Nachweismethode für die Bewertung des DNA-Schadenssignalwegs. Dieses Antikörperpaar ist ein empfindliches und wertvolles Instrument zur Untersuchung der Faktoren, die DNA-Schäden auslösen und die DNA-Reparatur beeinflussen, und ermöglicht die Erforschung der Beziehung zwischen DNA-Schäden, Zellzyklus-Kontrollpunkten und der Einleitung der Apoptose.
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