Enzyme-Reagenzkit AC562T-100

Chromatographiefür Forschungszweckefür ELISA

Der CBIACTH-Immunoassay ist ein LumELISA (Chemiluninescence Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) mit zwei Teststellen zur Messung der biologisch aktiven 39-Aminosäure-Kette von ACTH. Ein polyklonaler Ziegen-Antikörper gegen ACTH, gereinigt durch Affinitätschromatographie, und ein monoklonaler Maus-Antikörper gegen ACTH sind spezifisch für genau definierte Regionen des ACTH-Moleküls. Ein Antikörper ist so präpariert, dass er nur das C-terminale ACTH 34-39 bindet, und dieser Antikörper ist biotinyliert. Der andere Antikörper ist so präpariert, dass er nur die mittlere Region und das N-terminale ACTH 1-24 bindet, und dieser Antikörper ist zum Nachweis mit Meerrettichperoxidase [HRP] markiert. Bei diesem Assay werden Kalibratoren, Kontrollen oder Proben gleichzeitig mit dem enzymmarkierten Antikörper und einem Biotin-gekoppelten Antikörper in einer mit Streptavidin beschichteten Vertiefung der Mikroplatte inkubiert. Am Ende der Assay-Inkubation wird die Mikrotiterplatte gewaschen, um ungebundene Komponenten zu entfernen. Nach Zugabe des Luminolsubstrats ist die Enzymaktivität in der enzymgebundenen Fraktion direkt proportional zur ACTH-Konzentration in der Probe. Es wird eine Standardkurve erstellt, die die Lichteinheit (RLU) mit der ACTH-Konzentration in Beziehung setzt. Die ACTH-Konzentrationen in den Kontrollen und Proben werden direkt aus dieser Kurve bestimmt.