RNzol LS-Reagenz
----Blut-/Flüssigkeitsproben-Gesamt-RNA-Extraktionskit (Spin-Säule)
Beschreibung
RNzol LS Reagenz ist ein gebrauchsfertiges Reagenz für die Isolierung von Gesamt-RNA aus Vollblut und anderen flüssigen Proben. Das Reagenz, eine einphasige Lösung aus Phenol und Guanidin, ist eine Verbesserung der von Chomczynski und Sacchi entwickelten einstufigen RNA-Isolationsmethode. Während der Probenhomogenisierung oder -lyse bewahrt das RNzol LS-Reagenz die Integrität der RNA, während es Zellen aufbricht und Zellkomponenten auflöst. Durch Zugabe von Chloroform und anschließende Zentrifugation wird die Lösung in eine wässrige und eine organische Phase getrennt. Die RNA verbleibt ausschließlich in der wässrigen Phase. Nach Transfer der wässrigen Phase wird die RNA durch Fällung mit Isopropylalkohol gewonnen. Nach Entfernung der wässrigen Phase können die DNA und die Proteine in der Probe durch sequentielle Fällung zurückgewonnen werden.
Die mit dem RNzol LS-Reagenz isolierte Gesamt-RNA ist frei von Protein- und DNA-Kontamination. Es kann für die Northern-Blot-Analyse, Dot-Blot-Hybridisierung, Poly(A)+-Selektion, In-vitro-Translation, RNase-Schutzassay und molekulares Klonen verwendet werden. Zur Verwendung in der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) wird die Behandlung der isolierten RNA mit DNase I vom Amplifikationsgrad empfohlen, wenn die beiden Primer innerhalb eines einzigen Exons liegen.
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