Das SC2 Real-Time PCR Detection Kit ist für den spezifischen und qualitativen Nachweis von SARS-CoV-2-RNA in Proben wie Oropharyngealabstrichen, Nasopharyngealabstrichen oder Sputum mit Verdacht auf SARS-CoV-2 bestimmt.
Prinzip
Die Primer und Sonden werden aus den Regionen von RNase P, ORF1ab, N-Gen und E-Gen ausgewählt. Drei Primer-/Sonden-Sets sind für den spezifischen Nachweis von SARS-CoV-2 bestimmt. Ein zusätzliches Primer-/Sonden-Set zum Nachweis des menschlichen RNase-P-Gens (als interne Kontrolle) ist ebenfalls enthalten. Die aus respiratorischen Proben extrahierte RNA wird revers transkribiert und in einem Real-Time PCR Thermocycler (z. B. Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Instrument) amplifiziert. Das Fluoreszenzsignal wird abgegeben, wenn die 5'-Nuklease-aktive Domäne der Taq-Polymerase die Sonde an die Zielsequenz zwischen dem Vorwärts- und dem Rückwärtsprimer bindet. Während jedes Zyklus wird die Fluoreszenzintensität durch die zusätzlichen Reporterfarbstoffmoleküle erhöht, die von den jeweiligen Sonden freigesetzt werden.
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