Mindestanzahl der Bestimmungen 12 Präparate (bis zu 4 Objektträger pro Präparat)
Verfahrenszeit 30 Minuten
Haltbarkeit des Produkts 1 Jahr
Lagerungsbedingungen 15-25°C
Ergänzende Ausrüstung Glasstab, Tröge für das Spülen in destilliertem Wasser
Anwendung
Methode zum Nachweis von argentaffinen Proteinen (100 kD), die in der nukleolären
Organisationsregion (NOR) in paraffineingebetteten Schnitten und Abstrichen vorhanden
sind.
RINZIP
Die argyrophile Reaktion basiert auf der intrinsischen Fähigkeit des nukleolären Proteins 100 kD – das zusammen mit der RNA- Polymerase I die sogenannten „AgNOR“ bildet, d. h. jene Proteine, die an die NOR gebunden und durch Silberimprägnierung nachweisbar sind – als Reduktionssubstanz auf das in der Lösung vorhandene Silberion zu wirken und dieses in der zu metallischem Silber reduzierten Form zu binden. Zum Zeitpunkt der Verwendung wird die Silbernitratlösung mit einer Lösung gemischt, die ein positiv geladenes Hydrokolloid enthält und die den Kontakt zwischen den Reduktionsgruppen, die in den nuklelären Proteinen enthalten sind, und dem Silberion in der Lösung begünstigt.
HINWEISE
- Zum Spülen muss destilliertes Wasser hervorragender Qualität verwendet werden.
- Keine polylysinierten Objektträger verwenden.
- Die Verwendung von Metallgegenständen (Körbe, Pipetten) vermeiden.
- Nach der Fixierung die Objektträger im Dunkeln lagern.