Enzyme-Reagenzkit RScript™

umgekehrte TranskriptaseFarbstofffür cDNA-Synthese

Bei diesem Produkt handelt es sich um einen Ein-Röhrchen-Mastermix für die genomische Eliminierung und die reverse Transkription, mit dem die genomische DNA-Entfernung und die cDNA-Synthese gleichzeitig in einem einzigen Schritt durchgeführt werden können, wodurch das Risiko der Probenkontamination und des RNA-Abbaus durch komplexe Zusätze wirksam vermieden wird. Das Produkt enthält eine hochwirksame RScript II Reverse Transkriptase, die den ersten Strang der cDNA aus sehr geringen Mengen an Gesamt-RNA oder Poly(A)-mRNA synthetisiert und damit für die reverse Transkription von RNA-Vorlagen mit hohem GC-Gehalt und komplizierten Strukturen geeignet ist. Das Enzym hat eine stark verbesserte thermische Stabilität und kann die Reaktionstemperatur bis zu 65°C tolerieren und eine höhere Ausbeute an synthetisierter cDNA erzielen. Durch die Zugabe der hitzeempfindlichen dsDNase kann die restliche genomische DNA bei Raumtemperatur aus der Probe entfernt werden. Die Inaktivierung bei 50°C hat keinen Einfluss auf die cDNA. Der optimierte 5×RScript II All-in-One RT-Puffer ist mit dem Random Primer und Oligo18 (dT) vorgemischt, kompatibel mit dem genomischen Verdau und der cDNA-Synthese. Reverse Transkripte sind mit Farbstoff- und Sonden-qPCR für die anschließende Genexpressionsanalyse kompatibel. Leistung der Reversen Transkription von RK003-0050 Unter Verwendung von 100 ng, 10 ng und 1 ng Hela-Zell-RNA als Templates wurde RK003-0050 mit zwei Wettbewerbern in reversen Transkriptionsreaktionen und anschließender qPCR verglichen. Die Amplifikationskurven zeigten eine hervorragende Leistung, insbesondere bei niedrigen Template-Konzentrationen, und übertrafen die der Wettbewerber.