Lipase-Reagenzkit LIP-20 series

Enzymeals LösungFarbstoff

Für die quantitative Bestimmung von Lipase in Serum oder Plasma. Nur für die In-vitro-Diagnostik geeignet. METHODENGESCHICHTE Diese Methode basiert auf der Spaltung eines spezifischen chromogenen Lipasesubstrats 1,2-O-Dilauryl-rac-glycero-3-glutarsäure-(6-methylresorufin)-ester, das mit Gallensäuren emulgiert ist. Die Enzymaktivität der Bauchspeicheldrüse wird spezifisch durch die Kombination von Gallensäure und Colipase bestimmt, die in diesem Assay verwendet wird. In Abwesenheit von Colipase wird praktisch keine Lipaseaktivität festgestellt. Colipase aktiviert nur die Pankreaslipase, nicht aber andere lipolytische Enzyme, die im Serum vorkommen. Der hohe Anteil an Cholaten sorgt dafür, dass die im Serum vorhandenen Esterasen aufgrund der stark negativen Oberflächenladung nicht mit dem chromogenen Substrat reagieren. PRINZIP Bei alkalischem pH-Wert wird das Lipase-Farbstoffsubstrat 1,2-O-Dilauryl-rac-Glycero-3-Glutarsäure-(6-Methyl-Resorufin)-Ester durch die katalytische Wirkung der Bauchspeicheldrüsenlipase gespalten und bildet 1,2-O-Dilauryl-rac-Glycerin und die instabile Verbindung Glutarsäure-(6-Methyl-Resorufin)-Ester. In dieser alkalischen Lösung wird diese Verbindung zu Glutarsäure und Methylresorufin abgebaut. Die Farbintensität des gebildeten roten Farbstoffs ist direkt proportional zur Lipaseaktivität. Diese Aktivität kann bei 578 nm gemessen werden. VORSICHTSMASSNAHMEN 1. Die Reagenzien enthalten Natriumazid in einer Konzentration von 0,09 %. 2. Mit Vorsicht handhaben. Die Entsorgung der Rückstände hat entsprechend den gesetzlichen Vorschriften zu erfolgen. Hämoglobinkonzentrationen von mehr als 400 mg/dL und Bilirubin von mehr als 60 mg/dL können den Assay stören. Für die Durchführung dieses Tests wird die Verwendung von Einweglaborgeräten dringend empfohlen.