Der Reagenzienkit ist für die differenzierte Bestimmung von Einzel-Nukleotid-Polymorphismen des Gerinnungssystems und des Folatzyklus durch Real-Time-PCR mit Schmelzkurvendetektion bestimmt. Die Kits enthalten nur Reagenzien für die Echtzeit-PCR.
Einführung
das "Molgen Genetics Haemostatic Disease (MTR/MTRR/MTHFR) Kit" ist für die differenzierte Bestimmung von 4 Einzelnukleotid-Polymorphismen (MTR:2756 A/G; MTRR:66 A/G; MTHFR:677 С/T und MTHFR:1298 А/C) in Genen des menschlichen Folatzyklus durch Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit anschließendem Schmelzen der Hybridisierungsprodukte mit einem fluoreszierenden Tag und Detektion von Schmelzkurven bestimmt.
Das Kit ist für die Verwendung mit dem Block-PCR-Cycler CFX96 (Bio-Rad, USA) wie dem Adaltis AmpliLab vorgesehen.
Das Assay-Kit kann in der klinischen Praxis für eine umfassende Untersuchung der genetischen Faktoren verwendet werden, die das Risiko von Störungen im Folatzyklus erhöhen.
Die Extraktion von menschlicher DNA aus klinischen Proben (Wangenepithel, Vollblut) erfolgt mit dem Kit "MOLgen Universal Extraction Kit".
Der Kit ist für die Analyse von 48 Proben, einschließlich Kontrollproben, ausgelegt.
Prinzip der Methode
Das Prinzip der Methode basiert auf der Amplifikation der ausgewählten humanen DNA-Region, gefolgt von der Detektion der Schmelzkurven der Hybridkomplexe in den PCR-Produkten und den spezifischen Sonden. Der Amplifikationsprozess besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA-Matrix, Annealing von Primern mit komplementären Sequenzen der DNA-Matrix und Synthese einer komplementären Kette aus diesen Primern mit Taq-Polymerase.
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