Das MOLgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5) Reagenzienkit ist für die differenzierte Bestimmung von Single-Nukleotid-Polymorphismen des Gerinnungssystems und des Folatzyklus durch Real-Time-PCR mit Detektion von Schmelzkurven bestimmt. Die Kits enthalten nur Reagenzien für die Echtzeit-PCR.
Einführung
das "Molgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5) Kit" ist für die differenzielle Bestimmung der Polymorphismen 20210 G/A des F2-Gens (Gerinnungsfaktor II, Prothrombin) und 1691 G/A (Leiden-Mutation) des F5-Gens (Gerinnungsfaktor V, Proaccelerin) durch Real-Time-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit anschließender Schmelzung der Hybridisierungsprodukte mit einem fluoreszierenden Tag und Detektion der Schmelzkurven bestimmt.
Das Kit ist für die Verwendung mit dem Block-PCR-Cycler CFX96 (Bio-Rad, USA) wie dem Adaltis AmpliLab vorgesehen.
Das Assay-Kit kann in der klinischen Praxis für eine umfassende Untersuchung der genetischen Faktoren verwendet werden, die das Risiko von Störungen des Blutgerinnungssystems erhöhen.
Die Extraktion menschlicher DNA aus klinischen Proben (Wangenepithel, Vollblut) erfolgt mit dem Kit "MOLgen Universal Extraction Kit".
Der Kit ist für die Analyse von 48 Proben, einschließlich Kontrollproben, ausgelegt.
Prinzip der Methode
Das Prinzip der Methode basiert auf der Amplifikation der ausgewählten humanen DNA-Region, gefolgt von der Detektion der Schmelzkurven der Hybridkomplexe in den PCR-Produkten und den spezifischen Sonden. Der Amplifikationsprozess besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA-Matrix, Annealing von Primern mit komplementären Sequenzen der DNA-Matrix und Synthese einer komplementären Kette aus diesen Primern mit Taq-Polymerase.
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