"Molgen Genetics Haemostatic Disease (B-Fibrinogen/FXIII) Kit" ist ein Assay-Kit für den Nachweis von Einzelnukleotid-Polymorphismus in den FGB- und F13A1-Genen des Blutgerinnungssystems mittels Real-Time-PCR mit Detektion von Schmelzkurven.
Einführung
der "Molgen Genetics Haemostatic Disease (B-Fibrinogen/FXIII) Kit" ist für den Nachweis des Einzelnukleotid-Polymorphismus G (-455)A im FGB-Gen (kodiert Fibrinogen und Gerinnungsfaktor I) und G103T im F13A1-Gen (kodiert die Untereinheit des Gerinnungsfaktors XIII A) in klinischen Proben (Vollblut, Wangenepithel) mittels Real-Time-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit Schmelzkurvenanalyse bestimmt.
Die Ergebnisse der Genotypisierung werden bei der komplexen Bewertung des Thrombophilierisikos (Anfälligkeit für erbliche Thrombophilie) berücksichtigt.
Die Extraktion von DNA aus klinischen Proben kann mit dem "Molgen Universal Extraction Kit" durchgeführt werden.
Das Kit ist für die Verwendung mit dem Block-PCR-Cycler CFX96 (Bio-Rad, USA) wie dem Adaltis AmpliLab vorgesehen.
Der Kit enthält Reagenzien, die für 48 Tests, einschließlich Kontrollproben, benötigt werden.
Prinzip der Methode
Das Prinzip der Methode basiert auf der Amplifikation der ausgewählten humanen DNA-Region mit anschließender Bildung von Hybridduplexen aus PCR-Produkt und spezifischer DNA-Sonde und dem Nachweis von Duplex-Schmelzkurven.
Der Amplifikationsschritt besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA-Matrize, Anlagerung der Primer an spezifische Stellen der DNA-Matrize und Primerverlängerung mit Taq-Polymerase.
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